作者:陈奎生 楚丽 赵志华 李晟磊 高冬玲 张云...真核细胞起始因子4e反义寡核苷酸人食管癌ec9706细胞株肝素酶转染
摘要:目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经脂质体转染食管癌EC9706细胞,采用原位杂交、Western Blot和Boyden chamber侵袭实验等方法检测抑制前后EC9706细胞中eIF4E及HPA表达情况及细胞侵袭力改变。结果:eIF4EASODNS转染食管癌EC9706细胞24、48、72h后,eIF4E及HPA的mRNA与蛋白表达量均较对照组有所降低(R0.05),且均以转染72h的抑制效应最为明显,在每个时间段内随剂量增加eIF4E ASODNS抑制效应明显增强(P〈0.05);eIF4E ASODNS对HPA蛋白、mRNA表达的抑制效应和对eIF4E蛋白、mRNA表达的抑制效应,呈正相关关系(蛋白r=10.02,mRNAr=10.17,P均〈0.01);eIF4E ASODNS体外转染食管癌EC9706细胞后,其穿越Matrigel的细胞数明显少于细胞对照组、空白对照组和无关对照组(P均〈0.05)。结论:eIF4E ASODNS可抑制食管癌EC9706细胞中eIF4E、HPA蛋白及mRNA表达,且可抑制食管癌EC9706细胞的浸润转移。该研究结果为临床治疗食管癌等恶性肿瘤浸润转移奠定一定的理论基础。
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