作者：潘月龙; 郑树; 方永明; 蒋文智maspin基因克隆基因工程细胞
摘要：[目的]构建表达人Maspin的基因工程细胞.[方法]提取健康人乳腺组织的总RNA,扩增出编码Maspin的全长cDNA,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Maspin,然后转染到正常的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中,应用RT-PCR和Western blot方法分别验证Maspin基因在CHOI/pcDNA3.1(+)/Maspin细胞中RNA水平和蛋白水平的表达,同时检测细胞培养上清中Maspin的蛋白分泌.[结果]经酶切证实,得到正向插入的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Maspin.Western blot分析证明Maspin成功转染到CHO中并表达,且分泌到细胞外.[结论]人Maspin基因可在靶细胞表达,并能分泌到细胞外,为进一步了解Maspin的功能和转Maspin基因细胞成为治疗恶性肿瘤的效应细胞奠定了一定的基础.
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