作者：柴海云; 张磊; 袁牧歌; 朱庆义蛋白酶k蜗牛酶dna提取
摘要：目的 探索一种新的真菌DNA提取方法, 该方法操作简便, 提取效率高, 耗时较短, 应用范围广.方法 将酶消化和C h e l e x - 1 0 0提取DNA方法联合起来, 配制一种新的DNA提取试剂.通过真菌I T S 4和I T S 5通用引物进行P C R, 对新的DNA提取试剂同市售的T a k a r al y s i sb u f f e r在DNA提取方面的效能进行评价, 同时对DNA浓度和纯度进行测定.结果 实验所用3 4株真菌, 自配试剂成功提取出3 2株真菌DNA; T a k a r al y s i sb u f f e r成功提出2 7株真菌DNA.对于两种方法都没能提出DNA的2株真菌, 经液氮研磨破壁后, 自制试剂均成功提取; 而 T a k a r al y s i sb u f f e r仅成功提取 DNA1株.结论 同市售试剂T a k a r al y s i sb u f f e r比较, 自配DNA提取液提取DNA质量相对较高, 可用于临床常见感染真菌的P C R诊断.对于某些真菌, 提取DNA之前先进行菌体破壁是必要的.
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