作者：徐赤宇; 刘翠杰; 吴建华; 仇芸; 赵瑾; 朱...新生隐球菌rna真菌液氮yeastkit酸洗玻璃珠法
摘要：目的 探讨快速获取高质量的新生隐球菌总RNA的实验方法。方法 选取新生隐球菌的荚膜株、荚膜缺陷株,分别设计采用4种方法提取总RNA：酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法。用紫外线分光光度计测量其OD260、OD280的值,并且进行琼脂糖凝胶电泳,同时应用定量PCR法鉴定RNA质量。结果 酸洗玻璃珠法、液氮研磨法、异硫氰酸胍一步法、冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法的RNA产量分别为0.2 μg/105细胞、0.4 μg/105细胞、0.1 μg/105细胞、0.6 μg/105细胞。结论 冷酸洗玻璃珠联合Yeast RNA kit法提取的RNA均一性和完整性最好,是简便、快捷地提取具有荚膜和细胞壁双重屏障的新生隐球菌RNA的理想方法。
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