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顶空-气相色谱法测定丁酸梭菌发酵液中短链脂肪酸含量

作者:魏琦麟; 向蓉; 袁明贵; 彭新宇; 康桦华; ...丁酸梭菌短链脂肪酸内标法乙酸丁酸

摘要:短链脂肪酸是丁酸梭菌生长代谢过程中的重要产物,是肠道内发生益生作用的主要物质之一。利用顶空-气相色谱(HS-GC)内标法测定短链脂肪酸,对该方法进行了方法学验证,并测定了丁酸梭菌在48 h发酵过程中短链脂肪酸含量的变化。结果表明:采用HS-GC可以很好地将各短链脂肪酸分离,且选用的内标物2-乙基丁酸与待测组分之间分离度较好;各短链脂肪酸标准品在0.1~20.0 mmol/L范围内,线性相关系数均大于0.999,检出限为0.01~0.17 mmol/L,定量限为0.02~0.53 mmol/L,3 d内稳定性良好,样品加标回收率在88.90%~108.71%之间,符合测定要求;发酵液中检测到乙酸和丁酸两种短链脂肪酸,且含量随发酵时间延长逐渐增加,在40~48 h期间,乙酸和丁酸含量分别稳定在11.9 mmol/L和14.1 mmol/L左右。该方法无需复杂的前处理操作,准确度和精密度均符合要求,总分析时间较短,适用于丁酸梭菌发酵液中短链脂肪酸的快速检测。

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