作者：邹丽辉; 王萌; 黄薇; 张恩毅; 肖飞; 王玉...重组蛋白质类参考物质
摘要：目的构建重组人β2微球蛋白表达体系，高效快速获取β2微球蛋白，为临床实验室检测参考物质的制备奠定基础。方法优化人β2微球蛋白序列，人工合成优化序列片段并与麦芽糖结合蛋白（MBP）分别克隆至pRSF-Duet载体以构建重组人β2做球蛋A表达质粒。使用大肠杆菌E．coli BL21（DE3）对重组质粒进行诱导表达，TEV蛋白酶切除MBP，全自动生化仪测定β2微球蛋白浓度。对重组蛋A在4℃和-20℃储存条件下的稳定性进行检测，对β2做球蛋白纯品与校准品的互通性进行分析。结果成功构建重组人β2微球蛋白表达质粒，异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）成功诱导重组蛋白表达，MBP-β2微球蛋白（MBP-β2-MG）浓度可达100mg/L，β2微球蛋白浓度可达185mg/L。在4℃和-20℃储存条件下监测64周，β2微球蛋白稳定存在。β2微球蛋白纯品与RANDOX生化校准品互通性良好。结论通过密码子优化，成功构建了重组β2微球蛋白的高效表达系统，β2微球蛋白可溶性高，稳定性好，与国际通用校准品互通性好，可充分满足该产品诊断试剂制备的需求。
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