作者:孟红旭; 姚明江; 任钧国; 刘建勋大鼠心肌细胞l型钙通道全细胞膜片钳
摘要:目的:观察细胞外Ba^2+对记录大鼠心肌细胞L型钙通道的影响。方法:采用急性酶解分离法获得大鼠的单个心肌细胞,使用全细胞膜片钳技术记录L型钙通道电流。采用Ba^2+替换台式液中的Ca2+和直接向台式液中加入Ba^2+(0-8 mmol/L),观察峰值电流15 min内的变化,数据采用5个以上细胞进行重复。结果:(1)台式液中的Ca2+被Ba^2+替换后,L型钙通道电流的失活速率明显减慢(P〈0.01);在台式液中加入少量Ba^2+(0.2,0.4mmol/L)时L型钙通道电流的失活速率无明显改变(P〉0.05),加入0.8 mmol/L Ba^2+时失活速率明显减慢(P〈0.05)。(2)与正常台式液比较,在细胞外液中加入Ba^2+(0.2,0.4 mmol/L)峰值电流衰减减弱,其中10 min和15 min两个时间点衰减差异明显(P〈0.01)。(3)在细胞外液中加入Ba^2+可下移电流电压曲线,改变翻转电位,减弱丹酚酸A对钙电流的抑制强度,使量效关系曲线右移。结论:在细胞外液中加入一定浓度的Ba^2+,能够减弱全细胞膜片钳技术记录大鼠心室肌细胞L型钙通道时出现的峰值电流衰减,改变通道的电压依赖特性,影响药物量效关系。
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