作者：谷绪顶; 王福军; 蒲通; 宋庆宝; 刘玉坤奈必洛尔关键中间体葡萄糖脱氢酶羰基还原酶酶催化合成
摘要：采用基因重组大肠杆菌表达(R)-羰基还原酶,通过优化诱导温度、碳源类型和补料速度,初步确定最佳产酶条件:诱导温度为28℃,碳源类型为葡萄糖,最佳补料速度为20ml/h,产酶活力提高至63.1U/g。利用葡萄糖脱氢酶耦合(R)-羰基还原酶催化制备奈必洛尔关键中间体(R)-2-氯-1-[(R)-6-氟苯并二氢吡喃-2-基]-1-乙醇,确定葡萄糖脱氢酶和羰基还原酶的最佳投酶量。当底物2-氯-1-[(R)-6-氟苯并二氢吡喃-2-基]-1-乙酮投料量为5g时,葡萄糖脱氢酶和(R)-羰基还原酶的最佳投酶量为1000U和120U,所制备目标化合物纯度98.3%,收率91%,手性HPLC纯度为99.6%,手性GC纯度为98.5%。
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