作者:欧阳曼; 王海龙; 赵影; 李小燕; 陈小佳成纤维细胞生长因子受体2慢病毒包装过表达重组细胞株
摘要:构建含有成纤维细胞生长因子受体蛋白2(FGFR2) 基因序列的重组慢病毒表达载体,与慢病毒包装质粒共转染包装细胞293T,获得过表达FGFR2 的重组病毒颗粒;用重组病毒颗粒感染人胚肾细胞(HEK)293 细胞,并用嘌呤霉素(20 μg/ml) 进行筛选,最终获得过表达FGFR2 的重组细胞株。蛋白质免疫印迹(Western Blot) 试验结果显示,该重组细胞株与空白对照HEK293 细胞相比能高表达FGFR2,实时荧光定量核苷酸扩增试验(QPCR) 和酶联免疫反应(ELISA)检测结果表明FGFR2 蛋白下游相关通路的uPA 等分子的转录和分泌水平上调,克隆形成试验也证实重组HEK293 细胞促增殖能力增强。结果表明,该重组过表达FGFR2 的细胞模型可用于下一步的功能研究以及靶向FGFR2 药物的筛选。
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