作者：林松挺; 陈正义; 钟文洲hbx肝癌细胞株notch信号通路多药耐药蛋白多药耐药
摘要：目的研究HBx转染对肝癌细胞株Bel-7404增殖、细胞周期以及多药耐药的影响，并探讨HBx转染诱导肝癌多药耐药发生的可能机制。方法选用人肝癌Bel-7404细胞株进行转染，根据HBx转染情况将细胞分为三组，分别为转染HBx细胞组（Bel-7404-HBx组）、转染空载体细胞组（Bel-7404-con组）和空白细胞组（Bel-7404组）；实时定量PCR检测各组细胞中HBxRNA的表达。Western blot法检测各组细胞中HBx、Notch-1和多药耐药蛋白（MRP）的表达，CCK-8法检测各组细胞增殖活性和多药耐性，流式分析仪检测各组细胞生长周期。结果PCR扩增凝胶电泳显示Bel-7404-HBx组有HBx片段出现，而其他两组未见HBxmRNA的表达：Western bolt结果显示在Bel-7404-HBx组处有蛋白条带（即HBx蛋白），而Bel-7404组和Bel-7404一con组未见表达。与Bel-7404组和Bel-7404-con组比较，Bel-7404-HBx组细胞增殖显著加快（P〈0．05）;与Bel-7404组和Bel-7404-con组比较，Notch-1和MRP在Bel-7404-HBx组的蛋白表达增加；细胞周期结果显示，与Bel-7404组和Bel-7404-con组比较，Bel-7404-HBx组GgGl期细胞显著减少（P〈0．05），S期显著增加（P〈0．01），G2／M期变化不大（P〉0.05）;多药耐药实验显示，与Bel-7404组和Bel-7404-con组比较，丝裂霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、顺铂和奥沙利铂在Bel-7404-HBx组中耐药指数明显增加（P〈0.05或P〈0．01）。结论转染HBx的Bel-7404细胞可能通过诱导Notch-1与MRP的过表达，最终导致肝癌细胞株Bel-7404增殖能力增强和多药耐药的发生。
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