作者：邓辰红; 王飞; 王文兰骨髓基质干细胞培养与鉴定体系brdu免疫组化流式细胞仪
摘要：目的探讨兔骨髓基质干细胞的培养与鉴定体系的建立方法与效果。方法空气栓塞的方式处死SPF级新西兰大白兔6只,分离骨髓组织,利用贴壁培养分离纯化兔骨髓基质干细胞,多次传代后以流式细胞术检测细胞表面抗原;以Brd U标记骨髓基质干细胞,将骨髓基质干细胞注入兔颅内,分别于注射1、3周后取脑组织制作石蜡切片,进行免疫荧光染色。结果通过贴壁法培养幼年兔骨髓细胞可获得较纯化的骨髓基质干细胞。免疫细胞化学染色显示骨髓基质干细胞中CD44~＋细胞率超过90%,细胞核未着色;流式细胞仪测定培养骨髓基质干细胞的CD90~＋细胞率为94.5%,CD34~＋细胞率为0.24%。Brd U标记显示得到了能够掺DNA合成期的骨髓基质干细胞,标记细胞所占的比例在40.0%以上。结论通过贴壁法培养幼年兔骨髓细胞呈多角短梭形,可获得骨髓基质干细胞,Brd U可作为体内示踪骨髓基质干细胞的标志物之一。
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