作者：谭韡; 于红刚; 罗和生; 周巍akt1慢病毒载体胃癌凋亡
摘要：目的探讨慢病毒载体靶向携带Akt1基因短发夹RNA（Akt1-shRNA）对胃癌细胞SGC-7901凋亡和增殖的影响。方法构建表达Akt1-shRNA的慢病毒载体,转染293T细胞后获得Akt1-shRNA的慢病毒颗粒,病毒感染胃癌SGC-7901细胞（SGC-LV-shAkt1）为实验组细胞,SGC7901细胞和转染慢病毒空载体SGC7901细胞（SGCLV-sh CON）为对照组细胞。Real-Time PCR检测Akt1 m RNA表达水平,Western blot检测胃癌细胞Akt1、phosphoAkt（ser473）和bcl-2蛋白表达水平,然后流式双染法、生长速率等方法检测Akt1 shRNA对SGC-7901细胞凋亡及增殖能力的影响。结果成功构建Akt1基因RNAi的慢病毒载体LV-shAkt1,病毒滴度为5×108 TU/mL。SGC-7901细胞转染后,实验组（SGC-LV-shAkt1）Akt1 m RNA和Akt1、p-Akt、bcl-2蛋白表达水平较对照组（SGC-7901、SGC-LV-sh CON）降低（P〈0.01）;（38.7±3.5）%的实验组细胞凋亡（P〈0.05）。SGC-LV-shAkt1细胞生长曲线平缓,生长速度较另两种细胞（SGC-7901、SGC-LV-sh CON）明显降低。结论靶向Akt1的RNAi能有效抑制胃癌细胞SGC-7901的生长,诱导胃癌细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路,下调抗凋亡蛋白bcl-2有关。
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