作者:冯东凡; 范东旭; 金松; 韩梅; 杨婷; 刘彦...notch信号通路血管平滑肌细胞双向电泳
摘要:目的探讨γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对体外培养糖尿病(DM)大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)Notch信号通路相关蛋白表达的影响。方法体外培养DM大鼠VSMCs,随机分为两组:正常培养基组(con组)、加入不同浓度(0.15、2.50、7.50μmol/L)DAPT的培养基组(实验组),72h后收集细胞,分别用双向电泳方法和Western blot法检测Notchl、Notch3、Notch4、Jagged-1、Jagged-2、DLL4蛋白的表达。结果①双向电泳图谱证实提取的蛋白中含有目的蛋白。(2)Western blot检测结果显示:随DAPT浓度的增加,Nocth1、Nocth3、Nocth4、Jagged-1、Jagged-2、DLIA各蛋白的表达均递减;7.50μmol/L组与对con组比较,差异有高度统计学意义(P〈0.01);0.15、1.25μmol/L组与con组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);0.15、1.25μmol/L组与7.50μmol/L组比较,差异有统计学意义(P〈0.05);0.15μmol/L组与1.25μmol/L组比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论DAPT作用于体外培养的DM大鼠VSMCs后,使其Notch信号通路相关蛋白表达减少,在一定浓度范围内(125~7.50μmol/L)呈浓度依赖性。
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