作者：呼格吉乐; 高乃康; 韩艳秋干扰rna细胞周期蛋白e侵袭
摘要：目的：构建人CyclinE新靶点的干扰RNA真核表达载体，观察CyclinE表达受抑制后的人脑胶质瘤细胞的侵袭能力的变化。方法构建4个新靶点CyclinE干扰RNA的真核表达载体后，用双酶切和碱基序列测定，转染载体到胶质瘤U251细胞株，将其分为U251组、PNC-U251组、PCyclinE-1-U251组、PCyclinE-2-U251组、PCy-clinE-3-U251组、PCyclinE-4-U251组。通过RT-PCR的结果检测各组CyclinE mRNA的表达量，将干扰效果最好的一组用Transwell小室法检测侵袭能力的变化。结果成功构建了新靶点CyclinE干扰RNA真核表达载体即PCyclinE-1、PCyclinE-2、PCyclinE-3、PCyclinE-4，而且CyclinE mRNA表达受到抑制，其中PCyclinE-1-U251组的穿膜细胞数为（45.4±2.7）个，U251组和PNC-U251组的穿膜细胞数分别为（75.2±2.9）个和（74.4±3.5）个，U251组和PNC-U251组的穿膜细胞数比较，差异无统计学意义（t =1.23，P=0.31），PCyclinE-1-U251组和U251组的穿膜细胞数比较，差异有统计学意义（t =15.00，P=0.00），PCyclinE-1-U251组和PNC-U251组的穿膜细胞数比较，差异有统计学意义（t =13.81，P=0.00）。结论本实验构建了新靶点CyclinE干扰RNA真核表达载体，PCyclinE-1-U251细胞侵袭能力减弱。
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