作者：李琳; 李坤; 王福强; 丁宁人核糖核酸酶抑制因子shrna逆转录病毒载体构建
摘要：目的 构建针对人核糖核酸酶抑制因子（hRI）的shRNA逆转录病毒载体，为探讨hRI抗肿瘤作用机制打下基础。方法 用亚克隆法将目的 片段pkd—dsRI和pkd从表达载体pKD—dsRI克隆到pLNCX上，用双酶切筛选得到阳性克隆后，用脂质体法将其转染到人肝癌细胞HepG2细胞中，用800mg／L G418筛选2周，产生稳定的细胞克隆后，用RT—PCR检测细胞中核糖核酸酶抑制因子mRNA表达的变化。结果 双酶切鉴定为阳性克隆。RT—PCR表明，对比空白组（0．790±0．014）和空载体组（0．904±0．027），干扰组hri基因表达（0．361±0．048）明显下调，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 成功构建了针对hRI的shRNA逆转录病毒载体。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
