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Ndfip1对MPP^+诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用

作者:王佳顺; 张灜丹; 祝瑾; 周志杰; 张芸; 顾...ndfip1神经保护作用细胞凋亡帕金森病

摘要:目的探讨Ndfip1对MPP+(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)诱导的帕金森病(Pkarkinson's disease,PD)细胞模型(人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞)的保护作用。方法利用已建立好的Ndfip1内源性表达(野生型,WT-SY5Y)、过表达(4HT诱导,SY5Y-N)、显性负表达(显性负载体,SY5Y-D)及抑制表达(Ndfip1 shRNA载体瞬时转染,SY5Y-I)四种不同SH-SY5Y细胞模型,采用MPP+诱导上述细胞形成PD细胞模型,利用MTT法在酶联免疫检测仪上测量OD490吸光值以计算细胞的存活率,采用Annexin V凋亡检测试剂盒和流式细胞仪测定细胞的凋亡率。结果 0.3 mmol/L浓度的MPP+可降低WT-SY5Y细胞存活率,增加细胞凋亡率,其他细胞模型的细胞存活率及细胞凋亡率也与此类似;当加入4HT时,SY5Y-N细胞中因Ndfip1大量表达可明显增加细胞存活率,抑制细胞凋亡率,与WT-SY5Y相比,差异有统计学意义(P〈0.05);而此时SY5Y-D和SY5Y-I细胞中因Ndfip1的表达被抑制不能明显增加细胞存活率,降低细胞死亡率(P〉0.05)。结论 Ndfip1对MPP+诱导的PD细胞模型具有明显的神经保护作用及抗凋亡作用,研究结果有助于对PD发病机制的研究,为PD的临床治疗开辟了新的思路。

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