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RNA干扰survivin基因对宫颈癌细胞中survivin蛋白表达及caspase-3酶活性的影响

作者:李元宏; 常冰梅survivin基因宫颈癌细胞survivin蛋白

摘要:目的观察RNA干扰survivin基因对宫颈癌细胞中survivin蛋白表达及caspase-3酶活性的影响。方法针对survivinmRNA序列设计合成3对编码小干扰RNA(siRNA)的DNA模板,构建shRNA重组质粒,转染Hela细胞,筛选获得转染效率最高的阳性克隆,阴性对照为阳性克隆随机打乱序列。Westernblot方法检测survivin蛋白表达,分光光度法检测caspase-3酶活性。结果干扰48h时,siRNA-168载体干预组干预效果最好,siRNA阳性质粒干扰组(实验组)survivin蛋白表达量为阴性对照组中survivin蛋白表达量的13%,是空白组survivin蛋白表达量的16%。干扰后caspase-3活性表达升高,实验组与阴性对照组、实验组与空白组相比差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论siRNA可有效抑制Hela细胞survivin蛋白表达。升高caspase-3酶活性。

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