作者：李军; 黄霞; 姚雪梅; 陈雪芬; 齐兴柱碱性磷酸酶大肠杆菌dh10b表达纯化活性分析
摘要：目的：克隆并表达E.coli DH10B碱性磷酸酶（AKP）成熟肽基因（phoAm）,为AKP的定向改构及应用奠定基础。方法：采用PCR法从E.coli DH10B基因组扩增phoAm;将phoAm克隆入表达载体pET28a,再转入E.coli BL21（DE3）进行表达;用免疫金层析法和SDS-PAGE法检测表达的重组rAKP;采用对硝基酚磷酸（pNPP）法测定rAKP的活性。结果：rAKP单体分子量约47 K,活性分析比对照菌提高21.5倍。结论：获得AKP成熟肽基因并得了到具有较高活性的重组rAKP。
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