作者：汤俊 王峥涛cyp1a2cyp2d1选择性探针大鼠肝微粒体反应动力学
摘要：目的建立大鼠肝微粒体CYP1A2和CYP2D1酶活性的快速测定方法并考察两种CYP酶反应动力学。方法利用CYP1A2和CYP2D1选择性探针底物即非那西丁与右美沙芬进行温孵实验,采用超高压液相色谱与质谱联用（UPLC-MS）的方法建立相应代谢产物的含量测定方法。结果非那西丁代谢产物对乙酰氨基酚的线性范围为0.409∽10.227μmol·L-1（r2=0.999 1）,LOD和LOQ值分别为0.067和0.267μmol·L-1;右美沙芬代谢产物去甲右美沙芬为0.020∽5.051μmol·L-1（R2=0.998 0）,LOD和LOQ值分别为0.002和0.007μmol·L-1。方法回收率分别为95.9%∽104.0%和102.1%∽107.1%,精密度以RSD值表示均低于5%。CYP酶活性测试及反应动力学表明,CYP1A2和CYP2D1的米氏常数（Km值）分别为（28.4±2.7）和（13.9±1.3）μmol·L-1;其代谢活性（底物浓度为10μmol·L-1时）分别为（1.47±0.12）和（3.98±0.09）nmol·mg-1。结论本实验建立的UPLC-MS分析方法快速、灵敏、准确、可靠,适用于药物代谢研究中CYP1A2和CYP2D1体外活性测定及其反应动力学分析。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
