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反相HPLC测定培养基中莫西沙星含量的方法学研究

作者:张翠莲; Charles; H.Nightingale; David;...莫西沙星反相液相色谱荧光检测

摘要:目的建立特定培养基中莫西沙星的HPLC测定法.方法取样品100μL,以加替沙星作内标,采用乙腈沉淀蛋白;常温下氮气吹干,用0.01mol·L-1盐酸200μL复溶后进样.色谱柱:Alhech Nucleosil 100(C18)柱(10μm,4.6mm×250mm);流动相:缓冲液-甲醇-乙腈(66.8:15.1:18.1),缓冲液为三乙胺-磷酸-水(0.37:0.30:99.3);流速1.3 mL·min-1,荧光检测器的激发波长和发射波长分别为295和418nm.结果在1.0~50.0μg·mL-1内线性关系良好,相关系数r=0.999 9(n=7).高低2个浓度质控样品的日内RSD在0.67%~0.81%之间,日间RSD在0.48%~0.89%之间,方法学回收率为98.43%~1∞.51%.结论本法灵敏、可靠、耐用、操作简便易行、分析时间短,并成功地应用于莫西沙星体外模型的细菌耐药性发展研究.

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