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高温促进含第1类整合子宿主菌的重组效率

作者:胡敏 赵克斌 杨泽华 武建才整合子类抗药性重组效率高温

摘要:目的探讨高温对大肠杆菌BL21(DE3)宿主中第1类整合子重组效率的影响。方法用pUC19为载体构建高表达整合酶的重组质粒pUCINT.随后在pACYC184载体的不同位置分别插入整合子以及氨基糖苷腺苷转移酶(aadA2)基因盒,该重组质粒命名为pACINAD,将这2种相容的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),将20株此菌株随机分成2组,每组各10株,分别在41℃和37℃培养24h后用荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定发生重组反应的整合子的拷贝数和总的整合子的拷贝数,前者与后者的比值即为重组效率。结果在41℃大肠杆菌BL21(DE3)宿主中所测得的重组效率为(1.8±0.5)×10^-3,在37℃的重组效率为(1.8±0.5)×10^4.41℃组明显高于37℃组,差异具有统计学意义(t=9.266,P〈0.01)。结论高温可显著提高由整合酶介导的aadA2基因盒的重组效率。

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中国药物与临床

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