作者：王小军; 赖大年; 马庆久; 黎成金; 武永忠...lovo细胞凋亡小体坏死转染旁观者效应细胞死亡流式细胞仪总rna双重染色
摘要：目的研究转染逆转录病毒载体(G1CEACDNa)的肠癌细胞LoVo株的死亡机制.方法脂质体法转染G1CEACDNa至LoVo细胞.TRIzol试剂提取总RNA,行RT-PCR间接验证CD基因的表达情况.用含1mmol·L-115-FC的1640培养基培养细胞,MTT法测细胞生长曲线和旁观者效应;透射电镜观察细胞的超微结构;流式细胞仪annexin Ⅴ和PI双重染色行凋亡相关检查.结果RT-PCR产物电泳显示在1.5kb处可见相应的显影条带.MTT比色实验示1mmol·L-15-FC作用下CD+LoVo细胞48h开始生长抑制,72h、96h、120h抑制率分别约为30%、50%、80%.电镜下可见凋亡的早、中、晚期细胞及凋亡小体,同时可见部分细胞呈坏死改变.流式细胞仪显示48h开始有少量细胞出现凋亡,72h、96h细胞群凋亡和坏死的比例分别为23.8%、35.1%和20.4%、26.0%.结论转染G1CEACDNa的LoVo细胞给予5-FC治疗,其细胞死亡机制为坏死和凋亡并存,凋亡相关过程的诱导可能是该治疗过程中旁观者效应的重要机制.
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