作者：赵燕慧; 赵辉; 彭少丹; 崔海燕; 李军强; ...结核分枝杆菌esat6rv3407rpfb人5型腺病毒
摘要：目的构建高效表达结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis,MTB）ESAT6、rv3407、Rpf B三个显性抗原基因（3 antigens,3Ag）的重组人5型腺病毒（Adenovirus 5,Ad5）载体疫苗,在小鼠模型中初步完成药效学研究。方法用Ad EasyTMXL腺病毒载体系统构建重组质粒p Ad5-3Ag,经Pac I线性化后转染AD293细胞获得表达3Ag融合蛋白的Ad5-TPA-3Ag;采用Western blot检测腺病毒载体中融合蛋白的表达;将纯化的病毒颗粒以肌肉注射和滴鼻两种方式免疫小鼠,采用ELISA检测血清中抗体效价,对病毒的免疫剂量进行优化。结果含3Ag基因的重组腺病毒载体构建成功。包装的病毒Ad5-TPA-3Ag以8×10^7IFU的剂量免疫小鼠42d时各抗原的效价最高,ESAT6肌肉注射和滴鼻的最高效价分别为4.54和4.87;rv3407肌肉注射和滴鼻的最高效价分别为3.41和3.60;Rpf B肌肉注射和滴鼻的最高效价为3.63和2.42。结论 Ad5-TPA-3Ag在小鼠模型中可以诱导良好的免疫应答,可能成为一种新型的针对MTB潜伏感染的候选疫苗。
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