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实时细胞分析法建立小肠上皮细胞生长实验模型

作者:时玉霞; 李茹柳; 邓娇; 王东旭; 朱易平; ...小肠上皮细胞实时细胞分析仪细胞生长表皮生长因子培养条件细胞模型

摘要:目的 利用实时细胞分析仪,并以表皮生长因子(EGF)为促进细胞生长的工具药,观察EGF在不同培养条件下对细胞生长的影响,为建立IEC-6细胞生长(增殖)药理实验模型提供参考。方法 以1×10~4/孔的密度将细胞接种于E-Plate16板,并以含10%血清DMEM培养24h,换成无血清DMEM培养(即血清饥饿)20h后,观察不同培养条件对细胞生长的影响及EGF的药效。结果 (1)10%血清时,EGF组(1、10、100μg·L~(-1))给药24、48、72h后,细胞生长指数与空白组比较均P〉0.05,提示含10%血清培养不能反映EGF的药效;(2)0%血清时,EGF(1、10μg·L~(-1))对无血清培养所致的细胞生长抑制有改善作用,但不能使其恢复正常水平(给药24、48、72h后,EGF组与5%血清空白组比较均P〈0.01),提示无血清培养不能反映EGF的药效;(3)0%、0.5%、1%血清可对细胞生长产生不同影响,其中0.5%血清既不会对细胞生长产生明显抑制,也不会由于促进细胞生长时间较长而不利于反映EGF药效;(4)0.5%血清时,EGF各剂量组给药24、48、72h后,均能促进细胞生长(细胞指数与空白组比较均P〈0.01),提示0.5%血清培养条件下可较好反映EGF药效;(5)重复验证了0.5%血清时EGF(10μg·L~(-1))促进细胞生长的药效。结论 在实时细胞分析仪建立IEC-6细胞生长(增殖)药理实验模型的参考方案:细胞以含10%血清DMEM培养24h,再以无血清DMEM培养(即血清饥饿)20h,然后加受试药,并以含0.5%血清培养48~72h,可观察其对细胞生长(增殖)影响的药效。

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中国药理学通报

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