作者：赵艳丽; 丁亚琴; 王慧; 章毅; 杨静; 刘云...胰岛素分泌电压依赖性钾通道sd大鼠
摘要：目的 研究1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1P）促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌效应及其分子机制,探索糖尿病治疗药物的作用靶点。方法 使用胶原酶P消化SD大鼠胰腺,Histopaque1077梯度离心获得胰岛,DispaseII消化得到胰岛细胞。不同浓度S1P（0-20μmol·L^-1）干预,观察低糖（2.8mmol·L^-1）和高糖（16.7mmol·L^-1）条件下胰岛素分泌的变化。膜片钳技术记录β细胞电压依赖性钾通道电流（Kv电流）,观察S1P干预后Kv电流的变化。钙成像技术记录β细胞内Ca^2＋浓度,观察不同浓度S1P（0-20μmol·L^-1）干预后细胞内的Ca^2＋浓度变化。结果 与低糖组相比,高糖组明显刺激了胰岛素的分泌（P〈0.01）。低糖条件下,S1P没有改变胰岛素分泌量（P〉0.05）。高糖条件下,S1P浓度依赖性增加了胰岛素分泌量（P〈0.01）。与对照组相比,S1P明显抑制了β细胞Kv电流（P〈0.01）。高糖条件下,S1P浓度依赖性升高了胰岛细胞内Ca^2＋浓度（P〈0.01）。结论 S1P可能通过抑制β细胞Kv电流、升高细胞内Ca^2＋浓度,最终促进葡萄糖刺激的胰岛素分泌。
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