作者：高默杰 徐忠伟 王凤梅 陈小义 呼文亮 徐...哇巴因华蟾毒配基hepg2细胞细胞周期细胞周期相关蛋白细胞凋亡钠泵
摘要：目的研究钠泵抑制剂哇巴因（ouabain）和华蟾毒配基（cinobufogenin）对人肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用及细胞周期的改变,初步分析其机制。方法以人肝癌细胞HepG2为靶细胞,MTT比色法检测哇巴因和华蟾毒配基对HepG2细胞增殖的影响;Hoechst 33342荧光染色检测细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞周期;实时定量PCR和Western blot检测CyclinA1、CDK2、PCNA和p21^CIP1表达的变化。结果哇巴因和华蟾毒配基可明显抑制HepG2细胞增殖,抑制作用呈时间-浓度依赖性。荧光染色显示药物处理24h后,细胞呈现典型的凋亡形态特征;细胞周期分析显示,实验组S期细胞比例升高,实时定量PCR和Western blot结果显示：哇巴因和华蟾毒配基可下调CyclinA1、CDK2和PC-NA的表达（P〈0.05）,上调p21^CIP1的表达（P〈0.05）。结论钠泵抑制剂可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,引起细胞周期S期阻滞,诱导细胞凋亡,这与其调节细胞周期相关蛋白的生成关系密切。
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