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曲古菌素A抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡

作者:周咏明; 薛克营; 陈艳红; 刘隽; 黄士昂曲古菌素a细胞凋亡端粒酶端粒酶逆转录酶

摘要:目的研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(trichostatin A,TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性及亚单位hTERT的表达并诱导凋亡的机制。方法采用MTT法和倒置相差显微镜观察不同浓度曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用,流式细胞仪检测600nmol·L^-1 TSA作用后的细胞凋亡情况,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化,liT-PCR分析端粒酶三个亚单位的mRNA表达情况。结果曲古菌素A对HL-60细胞的抑制作用具有时间和剂量依赖性,AnnexinV/PI双染色体法检测凋亡显示,600nmol·L^-1 TSA作用48h后,细胞凋亡率为42.6%。600nmol·L^-1曲古菌素A作用12、24和48h后,端粒酶活性分别下降为1.95±0.25、1.73±0.12和1.52±0.09。RT-PCR显示,端粒酶逆转录酶hTERT表达下降,而端粒酶RNA模板(hTR)和端粒酶相关蛋白(hTP1)表达无明显改变。结论曲古菌素A(trichostatin,TSA)抑制HL-60细胞端粒酶活性下降,并诱导凋亡,其机制可能与曲古菌素A下调hTERT转录水平有关。

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