作者:黄琛; 梁晓秋; 凌晖; 黄幼生; 向姝霖; 肖...dads人胃癌细胞mgc803细胞差异表达基因二烯丙基二硫诱导cdna文库阳性克隆抑制消减杂交新基因
摘要:目的建立二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌细胞MGC803细胞差异表达基因的cDNA文库.方法采用抑制消减杂交技术,筛选DADS处理人胃癌细胞MGC803细胞后差异表达的相关基因.经过抑制消减杂交和巢式聚合酶链反应扩增,获得富集的差异表达的cDNA文库,PCR检测插入片断的阳性克隆.结果建立DADS诱导人胃癌MGC803细胞差异表达基因的cDNA文库,并从消减文库中随机挑取的100个白色克隆中筛选个阳性克隆,发现插入片断为100~600bp.结论应用抑制消减杂交方法可有效筛选DADS处理人胃癌细胞MGC803细胞后差异表达的相关基因,其消减cDNA文库的建立,为进一步寻找胃癌发生相关新基因,深入揭示DADS对肿瘤细胞的作用机制提供了新的重要线索.
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