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活禽市场环境H9N2亚型禽流感病毒分子生物学研究

作者:陈腊梅; 吕君; 唐勇军活禽市场禽流感病毒h9n2亚型基因进化分析

摘要:目的监测活禽市场环境中H9N2禽流感病毒红细胞凝集素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)糖蛋白基因的分子进化特征,为防控人H9N2禽流感病毒提供依据。方法 2016年8月至2017年8月,采集自长沙市开福区活禽市场的76份环境样本开展禽流感病毒核酸检测,然后对4份H9亚型禽流感病毒核酸阳性样本进行HA和NA基因RT-PCR扩增和核苷酸测序,测序结果经在线BLAST比对和Mega 6软件构建进化树分析。结果从76份环境样本中检出A型禽流感病毒核酸阳性样本45份,H9亚型阳性样本30份,占总样本的39.47%。鉴定出H9N2亚型禽流感病毒2株,HA和NA基因进化分析显示,2株H9N2亚型禽流感病毒与2014-2017年国内H9N2亚型禽流感病毒聚集形成一个主要分支,与A/duck/Hong Kong/Y439/1997、欧亚和北美谱系代表株进化分支距离较远。本研究中的2株H9N2亚型禽流感病毒在HA蛋白连接肽位点出现2个碱性氨基酸(amino acids,aa),对禽表现为低致病性的分子特征;受体结合位点区域(receptor binding site,RBS)aa为LMG,为人源受体。结论 2016-2017年,长沙市开福区活禽市场环境中H9亚型禽流感病毒污染较重,环境中的H9N2亚型禽流感病毒对禽表现为低致病性的分子特征,具有容易感染人的受体特征。

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