作者：张艳英; 张召兴; 郭家媚; 李蕴玉; 李佩国...鸡致病性大肠杆菌外膜蛋白制备免疫原性
摘要：为了分析鸡源致病性大肠杆菌地方流行株外膜蛋白(OMPs)免疫保护性,本研究采用Sarkosyl法提取10株鸡源致病性大肠杆菌地方流行株的OMPs,进行浓度测定和超微结构观察,经SDS-PAGE和western blot分析其免疫原性。结果显示,制备的OMPs浓度为1026.632μg/mL~1715.589μg/m L;电镜结果显示其超微结构呈双层泡状的C形或O形;SDS-PAGE分析显示其大小集中在25 ku~55 ku;动物免疫结果显示其具有一定的免疫原性。用提取的OMPs免疫小鼠和雏鸡后,以鸡源致病性大肠杆菌强毒株EC-9攻毒,结果显示:OMPs对小鼠和雏鸡均具有较好保护力,对小鼠保护率为70%,对鸡的保护率为80%;间接EILSA法检测免疫小鼠后的抗体效价最高为1:400,免疫雏鸡后抗体效价最高为1∶800;MTT法检测免疫小鼠后的T淋巴细胞转化率最高为1.582,免疫雏鸡后的T淋巴细胞转化率最高为2.215;常规法分析免疫小鼠脾脏指数为5.334,雏鸡脾脏指数为3.981,表明OMPs可以诱导小鼠和雏鸡产生良好的体液免疫应答和细胞免疫应答。本研究提取的鸡源致病性大肠杆菌地方流行株Omps对小鼠和雏鸡均具有一定的免疫保护性,为致病性大肠杆菌的亚单位疫苗的研制奠定基础。
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