作者：崔蒙蒙; 李江南; 王刚; 何希君; 翁长江猪繁殖与呼吸综合征病毒原位杂交rnascope猪肺泡巨噬细胞石蜡包埋组织
摘要：为了直观、高效、特异性地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）感染细胞和组织中PRRSV RNA，本研究根据HP-PRRSV HuN4株ORF7基因序列设计8对28 bp～36 bp双“Z”结构的寡核苷酸探针（PRRSV-N- probes），建立了一种新的PRRSV RNA原位杂交检测的方法。该方法能特异性的检测PRRSV感染猪肺泡巨噬细胞（PAMs）中PRRSV RNA，而对猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病毒（PRV）感染PAMs中的核酸呈现阴性。应用该方法检测PRRSV感染仔猪肺脏、腹股沟淋巴结和胸腺石蜡包埋组织切片中PRRSV RNA，在感染的腹股沟淋巴结中PRRSV RNA呈现集中分布，而PRRSV RNA在肺脏和胸腺中呈弥漫性分布。该方法可用于细胞和组织中核酸的定位及分布规律的研究，特别是用于病毒含量较少的潜伏感染的检测，为PRRSV实验室检测和致病机理研究奠定了良好的试验基础和技术支持。
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