作者：杨利; 张浩明; 陈瑾; 乔绪稳; 侯继波; 郑...猪圆环2型病毒抗原定量夹心elisa纳米抗体
摘要：为建立快速定量检测猪圆环病毒2b型（PCV2b）抗原含量的方法,本研究采用重组抗PCV2b纳米抗体作为捕获抗体,鼠抗PCV2b单克隆抗体为检测抗体,建立了定量检测PCV2b的夹心ELISA方法。该方法不仅能够用于猪圆环疫苗中PCV2b抗原的检测,还可用于大肠杆菌或杆状病毒表达的PCV2b衣壳蛋白（Cap）亚单位疫苗的检测,且与其它猪病毒无交叉反应。该方法检测细胞培养PCV2b的线性范围是10~（43）TCID_（50）/mL~10~（55）TCID_（50）/mL,样品回收率为89.3%～105.6%,该方法批内、批间变异系数小于5%,重复性好。该方法与间接免疫荧光方法（IFA）检测相同样品时误差值小于10%,并且ELISA检测结果离散度更小。分别用两种方法定量PCV2b抗原,取相同抗原量免疫猪,其诱导产生的PCV2b抗体效价无显著差异。本研究构建的夹心ELISA方法在定量猪圆环疫苗中PCV2b抗原方面,与传统的IFA方法比较其显示了良好的符合性,并具有更好的重复性和更短的检测周期,是替代IFA方法用于PCV2b定量检测的更优选择。
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