作者：赵雯; 刘瑞菊; 孙军峰; 刘怀然; 韩宗玺; ...新城疫病毒基因vii型f蛋白裂解位点
摘要：基因VII型新城疫病毒（NDV）为我国NDV的主要流行病毒株,而经典疫苗株La Sota不能对鸡群起到有效的免疫保护。为研发针对NDV基因VII型流行病毒株的疫苗,本研究采用反向遗传操作技术,将La Sota的F基因编码区（CDS）替换为基因VII型流行病毒株CK/CH/LHLJ/1/06株的F基因CDS,并将替换后的F蛋白的裂解位点突变为La Sota的裂解位点,构建重组质粒p NDFLsp-m F。将p NDFLsp-m F与表达NP、P和L蛋白的辅助质粒共转染BSR-T7/5细胞,拯救获得表达基因VII型NDV F蛋白的重组病毒（r La Sota-m F）。生长曲线结果显示,与La Sota相似,r La Sota-m F能够在鸡胚中有效复制,病毒滴度EID50为10^9.375/0.1 m L。生物学特性测定结果显示r La Sota-m F的MDT为144.6 h,表明其为低毒力病毒株。将拯救获得的病毒连续传15代后所替换的基因及突变的位点能够在r La Sota-m F中稳定存在。本研究为研究与开发针对NDV不同基因型流行病毒株的疫苗奠定基础。
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