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Leachii支原体LppA蛋白的表达及其粘附特性鉴定

作者:王冠博 常继涛 刘云 于力leachii支原体膜脂蛋白lppa蛋白粘附特性

摘要:Leachii支原体可以引起犊牛多发性关节炎,与犊牛肺炎有关。为研究M.leachii LppA蛋白粘附特性,本研究采用大肠杆菌表达系统表达M.leachii LppA蛋白,并制备抗LppA多克隆抗体。胰酶敏感试验结果显示,全菌体蛋白经胰酶处理后,LppA蛋白条带消失,表明LppA蛋白是位于M.leachii细胞表面的膜脂蛋白。通过粘附抑制试验,利用激光共聚焦显微镜可以观察到抗LppA血清能够抑制M.leachii对胎牛关节滑膜细胞的粘附作用;同时,采用Columbas分析软件对共聚焦图片进行图像分析,结果显示1:25倍稀释的LppA多克隆抗体对M.leachii的粘附抑制率为58.3%,而同比稀释的M.leachii全菌体多抗的粘附抑制率为79.26%。此外,ELISA试验结果表明,重组LppA蛋白可以与关节滑膜细胞膜蛋白发生特异性粘附作用,并且这种粘附作用可以被抗LppA多抗特异性抑制。这些结果表明,LppA蛋白是M.leachii的一个粘附相关的外膜脂蛋白。

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