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高增殖性能犬流感CIV—PR8重组病毒的制备

作者:周洁文 滕巧泱 闫丽萍 边延峰 张旭 徐大...犬流感重组犬流感病毒pr8血凝效价病毒滴度

摘要:为获得高效表达犬流感病毒(CIV)HA和NA抗原的疫苗株,本实验通过反向遗传操作技术将A/canine/Zhejiang/01/2010(H3N2)犬流感病毒(简称zJCrV)的HA和NA基因与A/PuertoRico/8/34(H1N1)病毒(PR8)的6个内部基因进行重组,拯救并获得了一株重组病毒CIV—PR8。分别用含100EID,0的CIV—PR8和ZJCIV感染SPF鸡胚,含2×10^3TCID。的C1V.PR8和ZJCIV感染MDCK细胞,不同时间段取病毒样品测定血凝效价和TCD,值。两者比较表明,CIV-PR8分别在接种后36h和48h时血凝效价达到峰值,鸡胚尿液中效价可达2^10,为野生病毒株的16倍;细胞上清血凝价可达2s,为野生病毒株的4倍;病毒增殖曲线表明通过鸡胚扩增和细胞扩增,CIV.PR8的滴度均高于野生病毒株ZJCIV。结果表明,拯救的CIV-PR8增殖能力明显高于野生病毒株ZJCIV,该重组病毒有望成为犬流感疫苗研制的候选病毒株。

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中国预防兽医学报

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