作者：高华 高旭 姜成刚 赵立平 马学恩 周建华马传染性贫血病毒s2基因原核表达多克隆抗体
摘要：本实验为表达马传染性贫血病病毒（EIAV）S2蛋白和制备其抗血清，以EIAV感染性分子克隆pFDDV3—8为模板扩增S2基因，将其克隆于pMD18-T载体中，测序验证后，将S2基因亚克隆于pET-30a表达载体，构建s2基因的重组表达质粒（pET-EIAV-S2），并转化DH5OL受体菌。以终浓度为0．6mmol／L的IPTG诱导，表达的重组蛋白约20ku。Westernblot分析表明，该蛋白可与EIAV的阳性血清反应，具有免疫原性。该重组蛋白通过镍离子亲和层析进行纯化后，免疫新西兰兔。ELISA及westernblot分析表明，制备的兔多克隆抗体与EIAV的S2蛋白发生特异性反应。EIAVS2蛋白的重组表达及其抗体的制备为进一步研究S2辅助蛋白在EIAV复制与致病中的作用，以及S2基因反向遗传研究奠定了基础。
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