作者：徐君怡 曹际娟 郑秋月 裴轶君 于珂空肠弯曲菌结肠弯曲菌多重pcr变性高效液相色谱
摘要：本研究应用多重PCR反应（mPCR）结合变性高效液相色谱（DHPLC）技术建立食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测方法。以编码嗜热弯曲菌属的16SrRNA基因、编码空肠弯曲菌的gyrA基因和编码结肠弯曲菌的cdt基因为靶基因，选择3对引物，建立并优化了鉴别空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的mPCR体系，扩增产物分别为287bp、159bp和173bp。采用22株细菌验证了该mPcR具有特异性。mPCR检测的灵敏度在DNA水平上达到空肠弯曲菌10pg／μL、结肠弯曲菌1pg／μL；在人工模拟污染样品起始污染浓度为1．5个／mL时，42℃微需氧条件下培养24h即可被检出。在随机采集的172份冷冻鸡肉类样品中，检出了18份样品为空肠弯曲菌阳性，7份样品为结肠弯曲菌阳性。本研究建立的mPCR-DHPLC方法可特异、灵敏地实现对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测。
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