作者：刘长明 危艳武 陆月华 张朝霞 袁婧 黄立...猪圆环病毒1型感染性克隆病毒拯救
摘要：用PCR法扩增猪圆环病毒1型（PCV1）全长基因组，将2个基因组顺式连接插入到pUC19质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入SalI酶切位点作为分子靶标，拯救出带有分子标记的克隆病毒，命名为recPCV1／G株。通过免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）在病毒感染细胞中检出病毒抗原，其抗原性仅与PCV1／Cap蛋白单价特异性抗体发生反应，而与抗PCV2／Cap蛋白抗体无交叉。克隆毒株基因组内插入一个SalI酶切位点，可用PCR结合限制性片段长度多态性分析法（PCR-RFLP）与亲本病毒相鉴别。该毒株经细胞连续传10代，体外培养增殖性能稳定，病毒滴度达10^4.8 TCID50/mL。构建的PCV1感染性克隆，为今后开展该病毒的起源与演化、遗传变异规律、分子鉴别诊断等研究奠定了基础。
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