作者：陈金顶; 赵明秋; 索青利; 黄青云; 廖明抗体信号肽基因克隆序列测定真核表达载体构建蛋白质
摘要：根据抗体重链与轻链基因的核苷酸序列设计并合成了1对引物,以猪外周血淋巴细胞基因组mRNA为模板,通过RT-PCR方法获得了一大小约85 bp的DN段,并将其克隆到pGEM-T载体上进行序列测定,测序结果显示,猪抗体信号肽基因核苷酸序列长度为57 bp,编码19个氨基酸,核苷酸及推导的氨基酸序列与已发表的抗体信号肽基因序列一致,同时在信号肽基因3'端下游提供可供肽酶切割的窗口和外源基因的克隆位点.然后将信号肽基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,成功构建了一含信号肽序列的真核表达载体3.1-SFc,为外源基因在pcDNA3.1(+)中的表达与分泌提供了一有效的信号肽,也为研究基因的功能奠定了基础.
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