作者:王春来; 刘思国; 王牟平; 彭永刚; 宫强; ...猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxiica基因克隆基因缺失
摘要:猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25-4株ApxⅡCA基因用特异性引物进行PCR扩增并克隆到T载体上,构建重组质粒pMD18-ApxⅡCA,将pMD18-ApxⅡCA转化到E.coliJM83中并测序。序列分析表明血清型7型25-4株ApxⅡCA与其它血清型(5型和9型)核苷酸序列同源性达98%以上,氨基酸序列同源性达90%以上。利用ApxⅡC基因内部单一的SpeⅠ位点,设计特异性的引物,利用PCR技术在ApxⅡC基因内部缺失165bp的核苷酸片段,PCR产物再用SpeⅠ进行酶切,并体外连接构建得到含有ApxⅡC缺失基因的重组质粒pMD18-ApxⅡ△CA。
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