作者:代晶 杨万清高效液相色谱法氯胺酮去甲氯胺酮大鼠肝微粒体性别差异代谢速率
摘要:目的:建立同时测定大鼠离体肝微粒体中氯胺酮和去甲氯胺酮含量的方法,比较氯胺酮在雌雄大鼠肝微粒体中代谢的性别差异。方法:采用高效液相色谱法,以非那西丁为内标,色谱柱为WelchromC18,流动相为乙腈-0.015mol.L-1乙酸胺(加醋酸调pH5.85)=40:60,流速为1mL.min-1,检测波长为215nm,柱温为30℃,进样量为20μL。比较5~1000μg.L-1氯胺酮在雌雄大鼠离体肝微粒体(1.0mg.mL-1)中孵育15min的代谢情况。结果:氯胺酮检测浓度的线性范围为0.1~20.0μg.L-1(r=0.999)和20.0~1000.0μg.L-1(r=0.994),去甲氯胺酮的线性范围为0.1~20.0μg.L-1(r=0.998),最低检测限均为2ng.mL-1;日内RSD均小于10.8%,日间RSD均小于12.7%;方法回收率分别为(89.6±8.5)%~(102.5±6.4)%、(86.5±3.6)%~(101.7±4.8)%,提取回收率分别为(90.6±6.3)%~(92.8±4.2)%、(84.5±7.9)%~(87.7±5.5)%。加药量在5~1000μg.L-1时,氯胺酮消除速率和去甲氯胺酮生成速率在雄大鼠肝微粒体中均明显高于雌大鼠。结论:本方法灵敏、简便、准确,可用于大鼠肝微粒体中氯胺酮和去甲氯胺酮的含量测定。氯胺酮在大鼠离体肝微粒体中的代谢存在性别差异。
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