作者：刘爱萍; 任珍芸; 刘佳; 王欣茹; 王玺; 李...肺炎球菌结合疫苗破伤风类毒素己二酸二酰肼免疫原性
摘要：目的：以破伤风类毒素（tetanus toxoid,TT）和己二酸二酰肼（adipic acid dihydrazide,ADH）衍生的TT（TTAH）分别作为载体蛋白制备14型肺炎球菌多糖-蛋白结合物,比较2种结合物在小鼠体内的免疫原性。方法：以1-（3-二甲氨基丙基）-3-乙基碳二亚胺（EDAC）作为缩合剂,介导TT与ADH反应,制备TTAH衍生物,2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS）法测定TTAH的-AH衍生率;将14型肺炎球菌多糖（PS14）水解并用1-氰基-4-二甲基氨基吡啶四氟化硼（CDAP）活化后直接与TT或TTAH结合,结合物经Sepharose 4 FF层析柱纯化后收集分配系数（KD）〈0.2的样品并除菌过滤作为结合物原液,并对其生化指标、血清学特异性和小鼠免疫原性进行检测。结果：2种结合物原液游离糖含量均在1%以内,多糖回收率分别为PS14-TT：33.80%及PS14-TTAH：29.15%。与A组（多糖组）相比,2种结合物B组（PS14-TT）和C组（PS14-TTAH）能够诱导更高的抗PS14抗体水平（P〈0.001）并具有剂次加强效应;与C组相比,B组能够诱导更高的抗PS14抗体水平且差异显著并具有统计学意义（P〈0.05）;2组结合物免疫3针后C组抗TT抗体水平高于B组,但差异无统计学意义,B组无剂次加强效应,而C组有剂次加强效应。结论：PS14-TT在小鼠体内诱导了较高的抗PS14抗体水平及较低的抗TT抗体水平,是较理想的多糖蛋白结合疫苗。
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