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北京鸭肝间充质干细胞分离、培养及分化潜能研究

作者:李婷婷; 许龙; 梁峻北京鸭间充质干细胞生物学特性诱导分化肝脏

摘要:试验旨在研究北京鸭肝间充质干细胞(liver mesenchymal stem cells,LMSCs)的分离、培养、鉴定及多向分化潜能等生物学特性。取孵化19日龄健康鸭胚通过酶消法分离出北京鸭LMSCs,进行体外培养,通过免疫荧光、RT-PCR和流式细胞术等技术对北京鸭LMSCs特异性标记物(CD29、CD44、CD71、CD73、CD90、CD105、CD133及CD166)进行检测,因北京鸭LMSCs分离过程中会存在少量造血干细胞,所以对造血干细胞特异性标记物CD31、CD34进行检测,同时对细胞进行成脂和成骨的分化诱导,检测其多向分化潜能。结果显示,通过酶消法获得的北京鸭LMSCs具有间充质干细胞特异性标记物,造血干细胞特异性标记物为阴性表达,证明其为肝间充质干细胞,且向成脂肪细胞和成骨细胞分化诱导。RT-PCR检测结果发现,成脂分化诱导中,过氧化物酶体增殖因子活化受体-γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)、脂蛋白酶(lipoprotein lipase,LPL)呈阳性表达;成骨分化诱导中,Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)呈阳性表达。北京鸭LMSCs较强的自我增殖能力可使畜禽遗传资源有无限利用的可能性,多向分化潜能强则说明重编程的水平较低,对畜禽种质资源的复原有巨大的优势,为组织再生研究提供了一定的理论基础,对于畜禽资源的开发与利用打开了一个更为宽广的平台。

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中国畜牧兽医

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