作者:杨素 陈博文 沙才华 廖秀云 秦爱建赤羽病赤羽病毒单克隆抗体制备鉴定
摘要:用纯化的赤羽病毒(akabane virus,AKAV)免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞和骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA筛选和3次有限稀释法克隆,得到2株能稳定分泌抗赤羽病毒单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株,分别命名为AKAVMcAb3A株和2C株。ELISA试验和中和试验结果表明,本研究制备的2株McAb均具有良好的特异性,为AKAV阳性,杂交瘤细胞培养上清液抗体的效价分别为1:640和1:320,腹水的效价分别为1:256000和1:128000,亲和常数(Ka)分别为1.16×10^-9和6.31×10^-8mol/L,3A株的相对亲和力大于2C株,具有病毒中和活性,中和效价分别为1:64和1:32,其IgG亚类为IgG1,轻链的亚型均为kappa型,2株细胞冻存3次复苏后仍能稳定分泌抗体,表明AKAVMcAb制备成功,为赤羽病快速诊断方法的研究奠定了基础。
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