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家猪Fosmid基因组文库的构建

作者:李冰; 闫守庆; 孙金海fosmid文库卫星dna

摘要:本研究采用蛋白酶K和苯酚抽提法提取基因组DNA,通过物理方法随机剪切DNA,经T4DNA聚合酶和T4多聚核苷酸激酶末端修饰,琼脂糖凝胶电泳回收大小为25-40kb的片段,与pCC1FOS载体连接,噬菌体包装蛋白体外包装,转染大肠杆菌EP1300,构建了家猪Fosmid基因组文库。文库容量为8.50×10^9CFU/ml,平均插入片段大小约25kb,用家猪MC1卫星DNA做探针对文库进行初步筛选,获得含该卫星DNA的阳性克隆,该文库的构建为进一步筛选并研究猪卫星DNA序列奠定了基础。

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中国畜牧兽医

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