作者：贾琳娜; 王小怡; 王博; 郭大玮h19差异甲基化甲基化敏感性限制性内切酶实时定量pcr精子dna
摘要：目的：研究位于H19转录起始点-3390 bp的HhaI位点是否为差异甲基化位点,为精子DNA识别提供新依据。方法：从51份血样和20份精子样本提取基因组DNA,每个样本分别在同一反应体系中进行甲基化敏感酶HhaI消化和荧光定量PCR反应（MSRE-qPCR）,扩增包含上述HhaI位点的114 bp片段。得到每个样本酶切前后的Ct值,用2^（-△△Ct）计算各样本酶切前后模板DNA相对表达量,将其作为DNA甲基化水平。结果：51份血样中该HhaI位点甲基化水平为（44.4±23.8）%,20份精子DNA甲基化水平为（120.5±52.5）%,差异有统计学意义（P〈0.001）。结论：甲基化水平高于94%可识别精子DNA,H19差异甲基化区114 bp序列的MSRE-qPCR分析为精子DNA的识别提供了一种新方法。
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