作者：付晶; 张伟; 张爱武; 马丽娟; 褚文辉; 李...鹿茸脱细胞基质软骨组织工程
摘要：目的 探讨鹿茸软骨制备脱细胞基质材料的可行性以及生物相容性,为软骨修复重建探索新材料。方法 取梅花鹿鹿茸生长中心间充质层,进行由DNA酶、RNA酶、抑肽酶等介导的脱细胞处理;行组织学和DNA含量检测,评价脱细胞效果。取第2代鹿生茸区骨膜（antlerogenic periosteum,AP）细胞,行荧光干细胞标记明确其干细胞特性后,用PKH26荧光标记并与制备的间充质层脱细胞基质进行复合培养;7 d后取材行HE染色观察以及荧光显微镜下观察PKH26标记的AP细胞在基质表面生长情况。以上观测均以未复合AP细胞的脱细胞基质作为对照。将复合培养7 d的样本移植至裸鼠一侧腹股沟（实验组）,取空白培养样本移植于另一侧（对照组）。于移植后7、21 d取材行HE染色,同时对组织进行冰冻切片并在荧光显微镜下观察PKH26标记成功的AP细胞在脱细胞基质表面及内部的生长情况,评价含AP细胞的脱细胞基质在裸鼠体内的组织相容性。结果HE和DAPI染色显示脱细胞处理后材料中无细胞残留,DNA含量为（19.367±5.254）ng/mg,较脱细胞处理前的（3 805.500±519.119）ng/mg显著降低（t=12.630,P=0.000）,提示成功制备间充质层脱细胞基质。AP细胞与间充质层脱细胞基质复合培养7 d后,AP细胞主要黏附于材料表面,部分进入脱细胞基质内部。植入裸鼠体内后,随观察时间延长,接种AP细胞可以在脱细胞基质材料中增殖并逐渐进入材料内部,并诱导血管生成。结论 实验成功制备鹿茸软骨脱细胞基质,该基质材料在离体和活体情况下适于种子细胞（AP细胞）的黏附和增殖,并具有刺激血管生成的功能,为其用于软骨组织修复提供理论依据。
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