作者：李青 陈元诗 杨丽 孙愚 汪燕 朱江化疗性卵巢损伤卵巢组织冷冻保存玻璃化冷冻法原位移植大鼠
摘要：目的 探讨卵巢新型玻璃化冷冻法--细针穿刺浸入式玻璃化冷冻法（needle immersed vitrification,NIV）保存与移植重建化疗性卵巢损伤大鼠模型的卵巢功能效果。方法 8～9周龄SPF级封闭群雌性Wistar大鼠52只,体重250～300g;选择至少有2次正常动情周期的50只大鼠纳入实验研究。随机取10只作为供体,采用NIV法冷冻保存卵巢组织并复苏。剩余40只大鼠根据处理方法不同随机分为3组：环磷酰胺组（C组,n=14）及环磷酰胺/移植组（C/T组,n=12）大鼠腹腔注射环磷酰胺,共21d,建立化疗性卵巢功能损伤模型后,并将复苏的卵巢组织原位移植于C/T组大鼠左侧卵巢囊内;对照组（NS组,n=14）大鼠每日腹腔注射2mL生理盐水,连续21d。比较各组大鼠动情周期恢复情况、卵巢组织重量、卵巢组织形态学改变、各级卵泡数目。结果 C/T组1只大鼠于移植术后2d死亡,其余大鼠均存活至实验完成。各组大鼠在注射结束后4周体重趋于一致,差异无统计学意义（P〉0.05）。NS组大鼠实验期间均具有规律、正常的动情周期,C组和C/T组大鼠在注射药物期间均出现动情周期紊乱。注射结束后,C组动情周期中位恢复时间为9d（95%CI：7.9～10.1d）,C/T组为6d（95%CI：4.9～7.1d）,两组比较差异有统计学意义（P=0.010）。C组在注射结束后4周卵巢组织重量呈明显下降趋势;C/T组大鼠移植卵巢组织均存活生长良好,其重量呈逐渐增加趋势。组织学观察示,C组与NS组、C/T组相比始基卵泡及初级卵泡数目均显著减少（P〈0.05）,C/T组与NS组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;各组次级卵泡和窦状卵泡数目比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论 将NIV法冷冻保存的正常卵巢组织移植于化疗性卵巢损伤大鼠模型体内后,能显著缩短动情周期恢复时间,移植卵巢组织生长良好,各级卵泡计数接近正常水平,初步提示具有化疗后重建卵巢内分�
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