作者：陈薇 李次会 武术 解慧琪 罗静聪小肠黏膜下层脱细胞处理生长因子死亡相关蛋白12
摘要：目的探讨机械-酶消化法对小肠黏膜下层（small intestinal submucosa,SIS）细胞残留量及生长因子含量的影响。方法取4h内市售新鲜猪空肠,采用机械处理（去除浆膜层、黏膜层及肌层）、脱脂、胰蛋白酶消化、去垢剂处理及冻干5个步骤制备SIS。每步操作后留取样品（n=4）,分别作为A、B、C、D、E组;以新鲜猪空肠作为对照（n=4,F组）。HE染色及扫描电镜观察组织学变化;采用Nest-PCR技术测定死亡相关蛋白12（death associated protein12,DAP12）含量;ELISA法检测VEGF、bFGF、TGF-β和TNF-α的含量。结果组织学及扫描电镜观察显示A、B组有细胞残留,C、D、E组未见细胞残留。Nest-PCR检测示各组均含有DAP12;A～F组DAP12拷贝数分别为（18.01±9.53）、（11.87±2.35）、（0.59±0.27）、（0.29±0.05）、（0.19±0.04）、（183.50±120.13）copy×106/cm2。F组DAP12含量显著高于A～E组（P〈0.05）,A、B组高于C、D、E组（P〈0.05）,C、D、E组间比较差异有统计学意义（P〈0.05）,A、B组间差异无统计学意义（P〉0.05）。ELISA法检测示A组VEGF、bFGF、TGF-β及TNF-α含量均显著高于其他各组（P〈0.05）;B、C、D、E组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论单纯采用机械法制备SIS有较多细胞残留;机械-酶消化法能有效去除细胞,显著降低DAP12含量,生长因子含量无明显改变。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
