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HPLC测定脱氧核苷酸钠的含量和有关物质

作者:吕雯; 纪宏; 丁锐; 周长明脱氧核苷酸钠脱氧胞嘧啶核苷酸脱氧腺嘌呤核苷酸脱氧胸腺嘧啶核苷酸脱氧鸟嘌呤核苷酸高效液相色谱法含量测定有关物质

摘要:目的 HPLC测定脱氧核苷酸钠的含量和有关物质方法的建立。方法色谱柱为Agilent Zorbax SAX(4.6mm×250mm,5μm),流动相为0.05 mol.L-1磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.80 g加水800mL,用磷酸调节pH值至3.3,加水稀释至1000mL),流速0.5 mL.min-1,检测波长258 nm。结果脱氧核苷酸钠中脱氧胞嘧啶核苷酸(d-CMP)、脱氧腺嘌呤核苷酸(d-AMP)、脱氧胸腺嘧啶核苷酸(d-TMP)、脱氧鸟嘌呤核苷酸(d-GMP)4种单核苷酸的进样量分别在0.017 6~3.382 7μg、0.019 6~3.758 0μg、0.014 8~2.847 7μg和0.018 0~3.452 8μg内与峰面积线性关系良好(r均为1.000);d-CMP、d-AMP、d-TMP、d-GMP的平均回收率分别为96.73%,97.51%,97.98%,98.39%;RSD分别为0.17%,0.39%,1.32%,0.32%(n=9);精密度、重复性良好。结论采用本方法主峰与杂质峰的分离度好,结果准确可靠,灵敏度高,为本品质量标准的修订和提高提供了基础。

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中国现代应用药学

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